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使用DNA提取試劑盒的注意事項有哪些
發布時間:2022-03-25 點擊量:43
   DNA提取試劑盒能提取所有類型土壤,以及包括糞便、腸內容物、生物固體等環境樣品的微生物總DNA。堆肥、底泥沉積物、糞肥等樣品的DNA純度非常高,可直接用于所有PCR、QPCR等下游實驗。PCR分析已經證明可成功提取所有類型環境微生物,包括格蘭性陰陽性菌、真菌、藻類、放線菌和線蟲等。
 
  DNA提取試劑盒的注意事項:
  1、由于樣品不同,提取的DNA含量和純度也有所不同,一般來說,如果所提取DNA用電泳的方法檢測不到,PCR會有結果,樣品盡可能的新鮮。否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。
 
  2、若試劑盒中的溶液出現沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影響提取效果。
 
  3、如果樣品消化不徹底,后面的離心步驟中可能會出現堵柱子的情況,可適當延長離心時間。
 
  4、洗脫緩沖液的體積不少于50ul,體積過小會影響回收效率;洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應保證其在可用NaOH將水的pH值調至此范圍,pH值低于會降低洗脫效率;DNA產物應保存在-20℃,以防DNA降解。
 
  5、DNA濃度及純度檢測(濃度較高時):得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關?;厥盏玫降腄NA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。
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